Uji Liebermann–Burchard atau uji anhidrida asetat adalah pengujian kimia yang digunakan untuk mendeteksi kolesterol. Pembentukan warna hijau atau hijau kebiruan setelah beberapa menit merupakan hasil positif.
Liebermann–Burchard adalah reagen yang digunakan dalam uji kolorimetri untuk mendeteksi kolesterol, yang memberikan warna hijau tua. Warna ini dimulai sebagai warna ungu kemerahan dan berkembang menjadi hijau muda kemudian hijau tua. Warna tersebut disebabkan oleh gugus hidroksil (-OH) kolesterol yang bereaksi dengan reagen dan meningkatkan konjugasi ketidakjenuhan pada cincin yang berdekatan. Karena uji ini menggunakan anhidrida asetat dan asam sulfat sebagai reagen, kehati-hatian harus dilakukan agar tidak terjadi luka bakar yang parah.
Metode
Larutkan satu atau dua kristal kolesterol dalam kloroform kering pada tabung reaksi kering. Tambahkan beberapa tetes anhidrida asetat, lalu 2 tetes H2SO4 pekat dan aduk perlahan. Setelah reaksi selesai, konsentrasi kolesterol dapat diukur menggunakan spektrofotometri.
Referensi
Campbell, Mary K. & Shawn O. Farrell. Biochemistry. (4th ed.). Singapore: Thomson Asia Pte Ltd. (2005).